色譜柱的種類與評價(jià)

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 一般地說，根據(jù)樣品的性質(zhì)決定采用何種液相色譜方法，然后再選擇不同類型的柱。即不同類型的柱則代表了不同的色譜方法。

    不同種類色譜柱的差異在于柱結(jié)構(gòu)、柱填料和柱尺寸的不同。

    色譜柱有不同的尺寸(長度和內(nèi)徑)，分制備型、常規(guī)分析型和微型。不同類型柱的硬件也不同，(包括接頭、柱管等方面)，還有徑向加壓柱和夾套加熱柱等。

    不同液相色譜法的尺寸根據(jù)需要可以選取，普通分析3～30cm長，內(nèi)徑4～8mm。常用20cm長、4.6mm內(nèi)徑的柱。制備型柱內(nèi)徑一般為8mm、25cm長。微型柱內(nèi)徑l～3mm，長10～20cm。不同的填料分析的效果可能不同，這是因?yàn)樯a(chǎn)過程不同所致。同一廠商生產(chǎn)的同種填料因批號不同也會有差異，這種差異可能從基質(zhì)就開始(表面積、雜質(zhì)、特殊處理)，還有鍵合的化學(xué)物質(zhì)(一氯或三氯硅烷反應(yīng)劑)，不同廠家生產(chǎn)的填料還會因技術(shù)(預(yù)處理、鍵合過程、填裝技術(shù))等不同而呈現(xiàn)較大差異。由于種種差異、僅能假設(shè)同一批號的柱有基本相同的性質(zhì)。

    多數(shù)柱填料基質(zhì)采用多孔硅膠微粒，通常有球形和無定形兩種，具有不同的粒度、孔徑和表面積。多孔聚合物微粒也適用于反相色譜。聚合物柱的流動相范圍廣，流動相pH值可在1至13之間。而硅膠基質(zhì)pH僅能在2.5和7之間。顯然，聚合物柱要好一些，但目前仍是以硅膠基質(zhì)的柱為主。原則上，聚合物柱可以克服硅膠基質(zhì)柱的某些不足，但需要大量的實(shí)驗(yàn)來證實(shí)，要進(jìn)一步考查聚合物基質(zhì)填料的全面*性。

    在實(shí)際工作中，選擇性能良好的色譜柱可得到好的結(jié)果，首先要注意柱徑、長度、填料種類和填料粒度。

    評價(jià)色譜柱的好壞不僅只是N數(shù)，還應(yīng)考慮組分在柱上的保留、鍵合相表面的物性、柱壓降以及峰不對稱因子As等。每一根新色譜柱都應(yīng)標(biāo)出詳細(xì)參數(shù)，主要內(nèi)容包括公司名稱、柱名稱(商標(biāo))、柱填料、尺寸。附一張標(biāo)準(zhǔn)參考色譜圖，并標(biāo)出色譜條件、樣品名稱、流動相組成、流速、柱溫、進(jìn)樣體積、檢測器、峰的保留時(shí)間及峰名稱等。評價(jià)一根色譜柱的主要指標(biāo)是：①塔板數(shù)N值；②峰不對稱因子As；③柱壓降；④鍵合相濃度。

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